Вверх страницы

Вниз страницы

Близ при дверях, у последних времен.

Информация о пользователе

Привет, Гость! Войдите или зарегистрируйтесь.


Вы здесь » Близ при дверях, у последних времен. » Новые формы электронного контроля » новейшие разработки (по оригинальным материалам )


новейшие разработки (по оригинальным материалам )

Сообщений 31 страница 37 из 37

31

vik.mi.67 написал(а):

никто не знает что в этой прививке напичкано.


сейчас, по-моему, уже такое время настало, что лучше не связываться с прививками

0

32

togiya написал(а):

сейчас, по-моему, уже такое время настало, что лучше не связываться с прививками

Если бы еще вирусы оставались прежними. Под час уже через несколько дней начинаются осложнения(при лечении)вплоть до пневмонии и т.п. У нас в больницах(не во всех) мест свободных не хватает- столько заболевших(.

0

33

Странный вирус какой-то: сама тоже неделю болела "на ногах" ("ломало всю" и температура 37-37,8, пила колдакт) , на работе уже несколько коллег  болели вовсю.., а в пятницу "слегла" совсем (температуры нет, но ломки остались+ головные боли и нос-горло обложило.) и до сих пор дома..(циклоферон и на всякий-антибиотик), позвонила на работу-там еще трое не вышли-дома лежат и пару школ в городе  закрыли на карантин...((.

+3

34

нас на заводе в сентябре прививали. Сделал тоже себе прививку пока не заболел. Хотя в цехе много больных процентов 70 кто на больничном кто на ногах переносит. Из цеха со мной 5 человек еще делали прививку. Из нас еще не кто не заболел и даже признаков заболевания нет.

0

35

А прививки от гриппа сейчас РФ-ные есть? Или все из-за бугра?

0

36

Введение нового гена в клетку

Ввести рекомбинантный ген в клетку можно 2 способами: используя вектора или путем прямого введения.

Требования к векторной ДНК, ее состав

Вектор - молекула ДНК или РНК, состоящая из двух компонентов: векторной части (носителя) и клонируемого чужеродного гена.
Задача вектора – донести выбранную ДНК в клетку-рецепиент, встроить ее в геном, позволить идентификацию трансформированных клеток,
обеспечить стабильную экспрессию введенного гена.

Таким образом, вектор должен быть небольшим, способным поддерживаться в клетке-хозяине (реплицироваться), многократно копироваться
(ампфлицироваться), экспрессировать соответствующий ген (содержать соответствующие регуляторные последовательности), должен иметь
маркерный ген, позволяющий различать гибридные клетки для эффективной селекции их; должен быть способен передаваться в клетку
соответствующего организма.

Регуляторные последовательности, отвечающие за стабильную экспрессию гена, будут рассмотрены позднее.

Можно выделить 2 группы маркерных генов, позволяющие отличить трансформированные клетки:

1. Селективные гены, отвечающие за устойчивость к антибиотикам (канамицину, тетрациклину, неомицину и др.), гербицидам (у растений).
Это могут быть гены ауксотрофности по какому-либо субстрату и т.д. Основной принцип работы такого маркера – способность
трансформированных клеток расти на селективной питательной среде, с добавкой определенных веществ, ингибирующих рост
и деление нетрансформированных, нормальных клеток.

2. Репортерные гены, кодирующие нейтральные для клеток белки, наличие которых в тканях может быть легко тестировано.
Чаще всего в качестве репортерных используются гены b-глюкуронидазы (GUS), зеленого флюоресцентного белка (GFP), люциферазы (LUC),
хлорамфениколацетилтрансферазы (CAT). К настоящему времени из этого арсенала наиболее часто используют гены GUS и GFP и,
в меньшей степени, LUC и CAT. Используемый в настоящее время как репортерный ген GUS является модифицированным геном из Escherichia coli,
кодирующим b-глюкуронидазу с молекулярной массой 68 кД. GUS активен в широком диапазоне условий среды с оптимумом при рН 5-8 и 37°С.
Он может гидролизовать обширный спектр природных и синтетических глюкуронидов, что позволяет подбирать соответствующие субстраты
для спектрофотометрического или флюориметрического определения активности фермента, а также для гистохимического окрашивания тканей in situ
(например, в синий цвет). Фермент достаточно стабилен: он устойчив к нагреванию (время полужизни при 55°С составляет около 2 ч)
и к действию детергентов. В процессе замораживания-оттаивания потери активности GUS не происходит. В составе химерных белков,
созданных генно-инженерными методами, GUS обычно сохраняет свою функциональную активность. В живых клетках белок GUS также весьма
стабилен и активен от нескольких часов до нескольких суток.

GFP (green fluorescent protein - зеленый флюоресцентный белок, или белок зеленой флюоресценции) был обнаружен Shimomura с соавт. в 1962 г.
у люминесцирующей медузы Aequorea victoria. Ген GFP был клонирован в 1992 г. Prasher и соавт., и уже через несколько лет началось
активное использование этого гена как репортерного в работах с самыми разными про- и эукариотическими организмами. В настоящее время
ген GFP применяется в сотнях работ во всем мире, и число их стремительно нарастает. Столь быстрый рост вызван особыми свойствами белка GFP,
а именно его способностью флюоресцировать в видимой (зеленой) области спектра при облучении длинноволновым УФ.
Эта флюоресценция обусловлена непосредственно белком, для ее проявления не требуется субстратов или кофакторов.
Благодаря этому свойству ген GFP является очень перспективным репортерным геном, позволяющим проводить разнообразные
прижизненные (недеструктивные) исследования с трансгенными организмами.

Многочисленные производные GFP получили общее название AFP (autofluorescent proteins - автофлюоресцентные белки).
Из морской анемоны Discosoma sp. недавно выделен еще один белок DsRed, флуоресцирующий в красном свете.
Еще несколько аналогичных флюоресцирующих белков было выделено в самое последнее время учеными Российской академии наук
из различных коралловых полипов порядка Anthozoa. Он может быть денатурирован очень высокой температурой, крайними значениями рН
или сильными восстановителями типа Na2SO4. При возвращении к физиологическим условиям GFP в значительной степени восстанавливает
способность к флюоресценции. В составе химерных белков, созданных генноинженерными методами, GFP обычно сохраняет свою
функциональную активность. В живых клетках белок GFP также очень стабилен.

CAT – гены отвечают за синтез хлорамфениколацетилтрансферазы (выделены из Escherihia coli).
Этот фермент катализирует реакцию переноса ацетильной группы от ацетил-КоА к хлорамфениколу.
Определяется гистохимически, по изменению окраски ткани при добавлении соответствующего субстрата.

LUC – ген кодирует фермент люциферазу (клонирована из бактерий и светлячка). Она вызывает свечение трансформированных клеток.
Бактериальный фермент состоит из двух субъединиц. Для определения активности ферментов необходимо специальное оборудование
- флуориметр и цифровая видеокамера с амплификатором светового сигнала. Фермент теряет активность при действии детергентов
и повышенной температуры.

Замена селективных генов на репортерные при отборе трансгенных растений часто весьма желательна,
так как возможность потенциального риска для окружающей среды и здоровья человека при использовании репортерных генов практически исключена.
Однако область применения репортерных генов шире, чем просто контроль трансгеноза.
Другое, и, очевидно, более важное назначение репортерных генов состоит в том, чтобы выявлять (по возможности количественно)
временные и пространственные особенности экспрессии данного конкретного гена, будь то собственного или чужеродного.
Присоединение репортерного гена к одной лишь промоторной области позволяет исследовать в "чистом виде" ее роль в регуляции экспрессии
изучаемого гена на уровне транскрипции.

Замена белок-кодирующей области гена на репортерную при сохранении участка, кодирующего 5'-концевую не транслируемую последовательность мРНК,
позволяет оценить роль этой последовательности в процессах транспорта мРНК из ядра в цитоплазму и инициации трансляции.

Одно из самых важных свойств гена - способность к экспрессии. За это свойство отвечают различные генетические элементы,
которые мы должны встроить в векторную молекулу, несущую ген.
https://studfiles.net/preview/6882437/page:8/


Вот такие светлячки! 

Это из старых лекций по ГИ.

Ещё из тех времён, когда человечество ничего не знало про CRISPR/Cas9

0

37

В 2016 году разведка США внесла технологию генного редактирования CRISPR в список потенциальных средств массового поражения.

Разработка биологического оружия была возможна и раньше, но она требовала гигантских ресурсов
и мощной научно-производственной базы, что было под силу только крупным государствам,
которые способны договорится между собой о неприменении такого оружия в реальных войнах.

Сейчас эти факторы перестают действовать.

Уже сейчас разработан биоинженерный вирус по блокированию выработки гормона гонадолиберина,
который отвечает за нормальную работу репродуктивной системы человека. При его разработке,
был использован  инженерный участок ДНК, который был спрятан внутрь неактивной вирусной оболочки.
Этот "код" встраивается в геном при заражении  мышечных тканей, и в итоге, после генного редактирования,
их мышечные клетки начинали производить антитела к гормонам. Так как мышечные клетки – одни из самых
стабильных в организме, они в состоянии вырабатывать антитела в большом количестве даже спустя
десятилетия после заражения. Подобный подход был использован для разработки метода долгосрочной
стерилизации человека.

Также уже разработан вирус, вносящий изменения в ген Prdm9.
Этот ген, в случае его изменения под влиянием вмешательства вируса,
создает репродуктивную несовместимость между различными членами одного и того же вида.

Люди с другой последовательностью расположения гена Prdm9 оказываются неспособны
производить потомство от людей со стандартной последовательностью этих генов.
Они в принципе могут произвести потомство в первом поколении, но это потомство
опять же будет бесплодным в браке с носителями стандартных генов Prdm9.
То есть происходит появление человека внешне не отличающегося от здорового,
но генетически с ним несовместимого.

Остались считанные годы до создания биологического аэрозоля, позволяющего локально,
на сравнительно небольших площадях заражения, без малейшей вероятности быстрого
выявления факта бактериологического нападения, безнаказанно уничтожать многомиллионные
популяции населения.

Краткосрочное существование очага бактериологического заражения, вследствие быстрого
физического разрушения аэрозоля, позволяет без опасения применять данный тип биологического оружия,
так как распространение  его за пределы очага заражения  практически невозможно.
Это существенно снижает психологический барьер его применения, потому что биооружие
начинает считаться безопасным для агрессора из-за селективности его применения.

https://russian.rt.com/article/151389
https://aftershock.news/?q=node/731207
https://zen.yandex.ru/media/htech_plus/ … 00a9f03ac4
http://gmoobzor.com/stati/texnologiya-r … vedki.html

За 100% достоверность информации не могу ручаться.  Но в целом выглядит правдоподобно.

0


Вы здесь » Близ при дверях, у последних времен. » Новые формы электронного контроля » новейшие разработки (по оригинальным материалам )